ECD后:尾吹氮气流量:32 mL/min。
1材料与方法1.1标本来源收集2019年4月我院收治的慢性HBV感染患者血清若干份,制备成6个浓度的混合血清,用于检测。目的:评价不同商品化试剂定量检测临床血清样本乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)性能的差异。
收集2019年7月我院收治的43例慢性HBV感染患者血清样本,其中男25例,女18例,年龄20~70岁。各试剂每批次均做阴性对照和北京康彻思坦生物技术有限公司生产的GBW(E)090137(靶值1.41103 IU/mL)、GBW(E)090139(靶值4.6106 IU/mL)两个水平的HBV DNA血清标准物质。(3)对于43例临床血清样本,试剂C、D和E的阳性检出率分别为95.35%(41/43)、95.35%(41/43)、86.05%(37/43);对于检测结果均在3种试剂定量范围内的24例临床血清样本,HBV DNA定量检测结果为CDE(P0.05),3种试剂的检测结果两两间均呈线性相关(C vs D:R2=0.93,Y=0.973X-0.164;C vs E:R2=0.61,Y=0.770X+0.210;D vs E:R2=0.69,Y=0.809X+0.270),试剂C和D、C和E、D和E的Bland-Altman分析发现其检测结果差值平均值分别为0.28、0.80和0.51 log10 IU/mL,相应的95%一致性界限分别为(-0.30,0.86)、(-0.62,2.21)、(-0.74,1.77),相应的95%一致性界限以内的点分别占95.83%(23/24)、95.83%(23/24)和91.67%(22/24),其一致性界限范围内检测值的最大差异分别为0.85、1.96和1.25 log10IU/mL。声明:本文所用图片、文字来源《临床血液学杂志》,版权归原作者所有。分别用3种国产试剂C、D、E对43例慢性HBV感染患者血清样本进行平行检测。
1.4统计学分析所有检测结果均以log10 IU/mL表示,采用SPSS 17.0和Medcalc 15.2.2软件进行统计学分析。目前我国市场上有多种进口和国产的商品化HBV DNA超敏定量试剂,并且均已获国家药品监督管理局(NMPA)批准,其中罗氏的AmpliPrep/COBAS TaqMan(CAP/CTM)HBV诊断试剂和雅培的RealTime HBV诊断试剂是目前国际上通用的HBV DNA检测试剂,前者在国际上应用更广泛。分类组成分析(LEfSe分析)如图4b所示。
因此,食用HRS可调节肠道细菌构成,改善因高脂饮食导致盲肠菌群失衡,进而调节血脂水平。声明:本文所用图片、文字来源《中国食品学报》,版权归原作者所有在科水平上,盲肠细菌类群相对丰度如图3c所示。与第2周相比,用高脂饮食喂养4周后金黄地鼠盲肠中拟杆菌门的相对丰度明显减小,厚壁菌丰度增大,而高剂量RS组拟杆菌以及相对丰度增大,厚壁菌门丰度减小。
与2周相比,HRS干预4周后,盲肠中代表性优势细菌瘤胃球菌科、毛螺菌科和拟杆菌科S24-7组的丰度增加,而真杆菌科稳定。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系相关链接:紫山药,脂肪酸,拟杆菌。
因此,厚壁菌门丰度的减小和拟杆菌门、变形菌门丰度的增大,有效改善了高血脂症症状(见表1)。有研究指出,肥胖人群中厚壁菌的比例较正常人群的显著增加,而拟杆菌门则低于正常人群,这是因为拟杆菌门较其它微生物如厚壁菌门需要更广的碳水化合物底物范围。声明:本文所用图片、文字来源《中国食品学报》,版权归原作者所有。有研究表明,瘤胃球菌对抗性淀粉的降解起重要作用,有利于能量释放。
因此,食用HRS可调节肠道细菌构成,改善因高脂饮食导致盲肠菌群失衡,进而调节血脂水平。分类组成分析(LEfSe分析)如图4b所示。抗性淀粉在肠道发酵过程中产生许多有益代谢物,可能有助于促进有益菌繁殖并增加肠道微生物群多样性。3.5盲肠菌群结构分析一些主要细菌科水平的变化用热图表示(图4a),以评价其对细菌门变化的贡献。
代表性优势细菌瘤胃球菌科、毛螺菌科、拟杆菌科S24-7组和梭菌属的丰度增加,有效改善了因高脂饮食导致的盲肠菌群失衡。2)高抗性淀粉干预4周后,盲肠中厚壁菌门的数量减少,拟杆菌门和变形菌门的数量增加。
高剂量HRS组的细菌科主要由丹毒丝菌科(Erysipelotrichaceae)、拟杆菌科S24-7组、真杆菌科(Eubacteriaceae)、瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)和毛螺菌科(Lachnospiraceae)组成。高、低剂量HRS组喂养4周与空白对照组、模型组喂养2周时盲肠内容物中多个分类群存在显著差异。
高剂量HRS组盲肠菌群多样性较其它组高,而模型组最少。4结论1)紫山药高抗性淀粉可有效减轻高脂血症金黄地鼠内脏的脂肪质量,降低血糖值。血液指标TC、TG和LDL-C浓度显著降低,HDL-C浓度增加。高脂饮食可减少肠道中可用碳水化合物量,增加肠道氧应激状态及其自身的次级代谢物,从而破坏肠道微生物环境抑制益生菌的增殖。与其它组相比,其中低剂量HRS干预4周时拟杆菌的丰度高,高剂量HRS干预组菌群主要为瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)和梭菌属(Clostridia)。虽然高、低剂量HRS组细菌科的构成相似,但不同细菌的丰度存在差异。
作用机理有待进一步探索。抗性淀粉通过上消化道进入下消化道,由细菌发酵产生重要的代谢产物,如短链脂肪酸,从而改善肠道微生态环境
1646cm-1处吸收峰与淀粉内部的结晶水有关,是醛基的C=O吸收峰。此结果与Martinez等的报告一致,他们发现生马铃薯抗性淀粉可减少脂肪组织的形成。
除HDL-C浓度外,低剂量RS组与模型组的血脂指标无显著差异(P<0.05)。而空白对照组和HRS组拟杆菌门、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和浮霉状菌门(Planctomycetes)相对丰度增大,而厚壁菌门的相对丰度减小,尤其以高剂量HRS组更为明显,而且相对丰度亦增大。
与第2周相比,第4周末模型组的拟杆菌数量显著减少,厚壁菌门增加,厚壁菌门与拟杆菌的比例增加,有研究表明肥胖小鼠的厚壁菌与拟杆菌的比例明显高于正常对照组。与模型组相比,高剂量HRS组的TC、TG和LDL-C含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.05),表明高剂量HRS饮食可使高脂血症明显减轻。可能是因为抗性淀粉经肠道菌群发酵产生短链脂肪酸,抑制脂肪合成酶活性,调节血液与肝脏中胆固醇再分配,从而抑制胆固醇与甘油三脂的合成。在1082和1160cm-1对应的是C-O键伸缩振动。
3.2器官和脂肪组织质量图2中显示了喂养4周后4组金黄地鼠器官质量和脂肪组织质量对比。相关研究证实,用玉米和高粱制备抗性淀粉亦能够降低血清胆固醇和血脂水平。
这是因为高脂食物诱导的血糖升高与肝脏细胞的糖原异常增加有关,在脂肪代谢障碍情况下,肝脏中脂肪积聚减弱,从而减弱了葡萄糖转化为脂质,导致血糖升高。在门水平上,不同组盲肠细菌的相对丰度如图3b所示。
NS在927cm-1处有D吡喃葡萄糖的I型吸收带,在709cm-1处有D-吡喃葡萄糖的III型吸收带,而HRS均没有,说明原淀粉经处理后D-吡喃结构被破坏。然而,高剂量HRS干预后血糖显著降低至正常水平(P<0.05)。
硝化螺旋菌门(Nitrospirae)、软壁菌门(Tenericutes)、绿菌门(Chlorobi)、疣微菌门(Verrucomicrobia)和蓝细菌(Cyanobacteria)等的丰度没有明显变化。3结果与讨论3.1傅里叶变换红外光谱NS和HRS的红外光谱图如图1所示。与正常对照组相比,高脂饮食导致肝脏和肾脏质量、附睾和肾周脂肪质量显著增加,内脏器官的质量增加源自于脂肪的大量积累。这些吸收峰在HRS中亦被观察到,但是3438,2928和1646cm-1处的峰较弱,表明HRS中羟基和醛基含量降低。
与第2周相比,喂养4周后正常对照组和高剂量HRS组盲肠菌群OTU数量明显增加,模型组和低剂量HRS组OTU数量有所减小。在NS光谱中,3438和2928cm-1处的强吸收峰分别对应于O-H和C-H键伸缩振动。
OTU数量是菌群相对丰度分析中的一个重要参数。3.4盲肠菌群变化各试验组金黄地鼠盲肠菌群序列的OTU数量曲线如图3a所示。
声明:本文所用图片、文字来源《中国食品学报》,版权归原作者所有。3.3血糖和血脂金黄地鼠的血糖和血脂指标对比如表1。